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預(yù)固定不動(dòng)難題

染色前固定不動(dòng)體細(xì)胞對(duì)流式的結(jié)果危害極大

大家一般由于下列幾類緣故采用先向體細(xì)胞固定不動(dòng)，隨后開(kāi)展流式的試驗(yàn)：便捷（許多 試驗(yàn)一天沒(méi)法做了）、安全性（有生物毒性的樣版務(wù)必固定不動(dòng)殺掉體細(xì)胞后開(kāi)展試驗(yàn)）及其胞內(nèi)染色。殊不知固定不動(dòng)會(huì)更改蛋白的表位，導(dǎo)致結(jié)果不精i確，乃至不正確。大家查看材料發(fā)覺(jué)Biolegend企業(yè)干了很多的試驗(yàn)，較為了不固定不動(dòng)和固定不動(dòng)（4%多聚甲醛）對(duì)流式的染色結(jié)果的危害。

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留意：

①多聚甲醛的固定不動(dòng)不是平穩(wěn)的，標(biāo)本經(jīng)多聚甲醛固定不動(dòng)后應(yīng)再經(jīng)過(guò)除污劑解決，假如標(biāo)本在溶液中侵泡的時(shí)間太長(zhǎng)，則會(huì)使化學(xué)交聯(lián)構(gòu)造瓦解。因而，應(yīng)防止固定不動(dòng)后的標(biāo)本在溶液中侵泡的時(shí)間太長(zhǎng)；

②若用多聚甲醛固定不動(dòng)飄浮細(xì)胞，由于細(xì)胞呈飄浮情況，清洗全過(guò)程繁雜，因而，應(yīng)留意抽濾時(shí)間不必太長(zhǎng)或轉(zhuǎn)速比太高。一般用200×g抽濾5min。

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